Original Breve
Diagnóstico prenatal y nueva mutación en enfermedad granulomatosa crónica ligada al cromosoma X
Prenatal diagnosis and novel mutation in X-linked chronic granulomatous disease
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A) Aspecto facial. B) Primer dedo grande y ancho.</p>" ] ] ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "D. Montoro Cremades, I. Manchón Trives, V. Botella López, L. Alcaraz Más, M.R. García Martínez, F. Galán Sánchez" "autores" => array:6 [ 0 => array:2 [ "nombre" => "D." "apellidos" => "Montoro Cremades" ] 1 => array:2 [ "nombre" => "I." "apellidos" => "Manchón Trives" ] 2 => array:2 [ "nombre" => "V." "apellidos" => "Botella López" ] 3 => array:2 [ "nombre" => "L." "apellidos" => "Alcaraz Más" ] 4 => array:2 [ "nombre" => "M.R." "apellidos" => "García Martínez" ] 5 => array:2 [ "nombre" => "F." 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Cada uno de los puntos que se visualizan en esta figura se corresponde con la localización exacta de cada caso. La Figura 1B es un mapa de cuartiles de la distribución espacial de las RIE en las 85 zonas de salud en la Región de Murcia. La localización de cada caso es el domicilio en el momento de diagnóstico. La división en áreas y zonas de salud se corresponde con la del año 2005. RIE = razón de incidencia estandarizada.</p>" ] ] ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "J.A. Ortega-García, F.A. López-Hernández, E. Sobrino-Najul, I. Febo, J.L. Fuster-Soler" "autores" => array:5 [ 0 => array:2 [ "nombre" => "J.A." "apellidos" => "Ortega-García" ] 1 => array:2 [ "nombre" => "F.A." "apellidos" => "López-Hernández" ] 2 => array:2 [ "nombre" => "E." "apellidos" => "Sobrino-Najul" ] 3 => array:2 [ "nombre" => "I." "apellidos" => "Febo" ] 4 => array:2 [ "nombre" => "J.L." 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B) Amplificación por RT-PCR entre el exón 5 y el exón 7 en el paciente (amplificado más acortado debido a la deleción del exón 6), madre portadora (con 2 bandas), padre y control sano. C) Secuencia de ADNc del paciente mostrando la deleción del exón 6.</p>" ] ] ] "textoCompleto" => "<span class="elsevierStyleSections"><span id="sec0005" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Introducción</span><p id="par0005" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La enfermedad granulomatosa crónica (EGC) es una inmunodeficiencia primaria que afecta aproximadamente a uno de cada 250.000 nacidos vivos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1,2</span></a>. Los pacientes con EGC son susceptibles de padecer infecciones recurrentes, particularmente aquellas causadas por bacterias catalasa positivas y hongos. En aproximadamente dos terceras partes de los enfermos sus primeros síntomas aparecen durante el primer año de vida. La clínica más frecuente es la infecciosa (linfadenitis, neumonías, abscesos cutáneos y hepáticos, osteomielitis, dermatitis) causada principalmente por <span class="elsevierStyleItalic">S. aureus</span> y bacterias gramnegativas (<span class="elsevierStyleItalic">Serratia marcescens</span> y <span class="elsevierStyleItalic">Burkholderia cepacia</span>), además de <span class="elsevierStyleItalic">Aspergillus</span> spp<span class="elsevierStyleItalic">.</span> Asimismo, la afectación gastrointestinal es común (hasta el 30% de los casos)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0015"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>. Por otro lado, los pacientes con EGC pueden desarrollar granulomas difusos que pueden causar obstrucciones o síntomas dolorosos en esófago, estómago, uréteres, vejiga y vesícula biliar además de fenómenos inflamatorios en pulmón y sistema nervioso central<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1,3-5</span></a>.</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La EGC está causada por mutaciones en el complejo enzimático de la NADPH (nicotinamida adenina dinucleótido fosfato) oxidasa, por lo que los pacientes son incapaces de producir radicales libres, necesarios para la destrucción de bacterias y/u hongos. Este complejo enzimático activado cataliza la reducción de la NADPH dependiente de oxígeno (O<span class="elsevierStyleInf">2</span>) para formar el anión superóxido (O<span class="elsevierStyleSup">−</span><span class="elsevierStyleInf">2</span>) altamente reactivo, que se combina espontáneamente con el hidrógeno para formar peróxido de hidrógeno (H<span class="elsevierStyleInf">2</span>O<span class="elsevierStyleInf">2</span>). La NADPH oxidasa es un complejo enzimático localizado en la membrana plasmática de los fagocitos y está formado por elementos de membrana como el flavocitocromo b<span class="elsevierStyleInf">558</span> (formado por la subunidad gp91<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span> y p22<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span>) y por cuatro componentes citosólicos: p40<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span>, p47<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span>, p67<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span> y Rac 2. En fagocitos activados se ensamblan y forman un complejo enzimático activo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0030"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>. Las mutaciones que afectan a cualquiera de los genes que codifican para las subunidades del complejo NADPH oxidasa pueden causar EGC. Aproximadamente, dos terceras partes de los casos de EGC son debidos a mutaciones en el gen <span class="elsevierStyleItalic">CYBB</span> (EGC ligadas al X), que codifica para la subunidad gp91 <span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span> (OMIM 306400). En cuanto a las formas autonómicas recesivas, la más frecuente se debe a mutaciones en el gen <span class="elsevierStyleItalic">NCF1</span>, que codifica para la subunidad p47<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span>, mientras que deficiencias en las subunidades p22<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span>, p67 <span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span><span class="elsevierStyleItalic">,</span> Ra<span class="elsevierStyleItalic">c</span>2 y p40<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span> son menos frecuentes (< 3% de los casos)<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0015"><span class="elsevierStyleSup">3,5</span></a>.</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El diagnóstico de EGC se realiza mediante pruebas de laboratorio que demuestran un funcionamiento anormal de la enzima NADPH oxidasa. Hasta mediada la década de los noventa del siglo <span class="elsevierStyleSmallCaps">xx</span>, el estudio funcional se hacía utilizando la prueba de azul de tetrazolio (NBT). Hoy en día, con la citometría de flujo se evalúa la actividad del complejo NADPH oxidasa midiendo la conversión de dihidrorodamina-123 (DHR) a rodamina-123 en fagocitos activados. Esta prueba es diagnóstica para la mayoría de los pacientes (excepto en la deficiencia primaria de mieloperoxidasa), y también puede ayudar a diferenciar entre las dos formas más comunes, EGC ligada al X (defecto de gp91<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span>) y EGC autosómica recesiva (defecto de p47<span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">phox</span></span>)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0030"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>.</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El objetivo de este trabajo es dar a conocer mediante la descripción de un caso clínico de EGC una mutación nueva y su caracterización funcional y molecular, así como ofrecer un diagnóstico prenatal rápido y consejo genético ante un segundo embarazo.</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Caso clínico</span><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se trata de un niño de 6 años, hijo de padres españoles que es derivado para descartar una inmunodeficiencia primaria. Sin antecedentes familiares previos de EGC. Antecedentes personales: a la edad de dos años, desarrolló un absceso latero-cervical izquierdo que necesitó drenaje quirúrgico. Posteriormente, entre los tres y los cinco años de vida desarrolló múltiples infecciones bacterianas de repetición: neumonías, sinusitis, otitis media aguda y abscesos (incluido un absceso periamigdalino). Presentó ocasionalmente fístulas perianales. No se objetivó retraso póndero-estatural. En el estudio inmunológico básico se observó hipergammaglobulinemia y poblaciones linfocitarias normales.</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Considerando los antecedentes personales del paciente se sospechó una deficiencia de células fagocíticas y se realizó estudio por citometría de flujo de la actividad NADPH oxidasa (test DHR) (Burstest, BD biosciences, Madrid, Spain) tanto al paciente como a los padres<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>.</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Además, se extrajo ADN genómico y ARN de sangre periférica del paciente y de sus padres. Se realizó la amplificación de los 13 exones (junto con las zonas de unión exón-intrón) del gen <span class="elsevierStyleItalic">CYBB</span> mediante PCR y posteriormente dichos amplificados se secuenciaron directamente en un secuenciador automático (Applied Biosystem 3100 Avant). El ADN fetal se extrajo de los amniocitos obtenidos de la funiculocentesis a las 14 semanas de gestación. Asimismo, se realizó análisis de los polimorfismos HLA, demostrándose que el ADN obtenido de los amniocitos era de origen fetal y no presentaba contaminación de origen materna<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0040"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a>.</p></span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Resultados y discusión</span><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La prueba DHR en el paciente demostró la ausencia de la actividad de la NADPH oxidasa y por tanto confirmó la EGC. El patrón DHR materno mostró una distribución bimodal correspondiente a su estado de portadora y en el caso del padre la prueba DHR resultó ser normal como en el control sano (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>. Por tanto, se pudo concluir que la forma de herencia de EGC era ligada al cromosoma X y que el componente proteico alterado era gp91<span class="elsevierStyleSup">phox</span> codificado por el gen <span class="elsevierStyleItalic">CYBB</span>. En este momento, se nos informó del nuevo embarazo de la madre (feto varón). Ante el riesgo de que el feto también padeciera la EGC, rápidamente, se realizó una búsqueda de mutaciones en el paciente a lo largo de los 13 exones y de las uniones intrón-exón del gen <span class="elsevierStyleItalic">CYBB</span>.</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Mediante secuenciación directa se identificó un cambio que producía una sustitución de A>G en la posición +4 del intrón 6 (IVS6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>+<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4A>G) de la secuencia del paciente con respecto a la secuencia normal publicada. Además, se identificó el mismo cambio en uno de los dos alelos de su madre. Esta mutación no estaba descrita anteriormente en las bases de datos y con el objetivo de confirmar que esta alteración (IVS6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>+<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4A>G) era realmente una mutación causante de EGC (y no un polimorfismo) se descartó su presencia en 50 controles españoles sanos (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>A)</p><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Además, se sospechó que esta sustitución de nucleótido encontrada en el paciente (IVS6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>+<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4A>G) podría afectar al procesamiento del ARN, debido a que esta posición es altamente conservada en las especies eucariotas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>. Este hecho fue confirmado a través de una RT-PCR (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>B) obteniendo un ADNc anormalmente más corto que el esperado. Posteriormente, se realizó la secuenciación de este amplificado y se confirmó la ausencia del exón 6 (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>C). Por tanto, esta mutación nueva (IVS6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>+<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4A>G) causa un procesamiento incorrecto del ARN observándose que al finalizar el exón 5 comienza el exón 7 con ausencia completa del exón 6. La secuencia de ADN del paciente se envió al GenBank con el N.° GU248714.</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La mutación provoca que esta zona conservada entre el exón 6-intrón 6 (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>C) no se reconozca como tal y se produzca la deleción del exón 6 completo. Otros autores (Heyworth et al<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a> y Barese et al<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a>) han descrito una mutación (IVS6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>+<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>5G>C) en una posición distinta a la encontrada en nuestro paciente aunque muy cercana y que también provocaba, como en nuestro caso, la deleción del exón 6 y cuya consecuencia era la ausencia del citocromo b<span class="elsevierStyleInf">558</span> y un fenotipo de los pacientes X91°.</p><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Una vez detectada la alteración molecular y confirmado que era la responsable de la enfermedad se realizó el diagnóstico prenatal de EGC ligada al X en la muestra fetal mediante secuenciación directa, evaluando el cambio descrito (IVS6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>+<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4A>G) (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>A). De esta manera se pudo responder al consejo genético solicitado para el segundo embarazo.</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la actualidad hay más de 300 mutaciones descritas en el gen <span class="elsevierStyleItalic">CYBB</span> y se han registrado en la XCGDbase (http://bioinf.uta.fi/CYBBbase). La mayoría de las mutaciones están distribuidas en los 13 exones y en las uniones intrón-exón; casi 200 de estas mutaciones son únicas. Las mutaciones de los sitios de procesamiento del ARN representan cerca del 10% de ellas<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1,13</span></a>.</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En resumen, en los casos de EGC es necesario un estudio molecular rápido que permita obtener un diagnóstico de certeza para el correcto tratamiento del paciente, permitiendo al mismo tiempo ofrecer un diagnóstico prenatal y consejo genético en futuros embarazos.</p></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Financiación</span><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este trabajo ha sido financiado parcialmente por el proyecto de investigación del Fondo de Investigaciones Sanitarias 06/0614. EM y LIGG obtuvieron un contrato de investigación de la Fundación Biomédica del Hospital Universitario 12 de Octubre.</p></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Conflicto de intereses</span><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.</p></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Agradecimientos</span><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A la Dra. M.<span class="elsevierStyleSup">a</span> Carmen Otero por enviarnos esta familia para estudio de inmunodeficiencia, al Dr. J. M. Millán por enviarnos las muestras de amniocitos y a María Jesús Torres, María José Díaz-Madroñero, Miguela Merchén, Isabel Castro y Carmen Domínguez por su excelente ayuda técnica.</p></span></span>" "textoCompletoSecciones" => array:1 [ "secciones" => array:11 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "xres1898785" "titulo" => array:5 [ 0 => "Resumen" 1 => "Introducción" 2 => "Métodos" 3 => "Resultados" 4 => "Conclusiones" ] ] 1 => array:2 [ "identificador" => "xpalclavsec1642627" "titulo" => "Palabras clave" ] 2 => array:2 [ "identificador" => "xres1898786" "titulo" => array:5 [ 0 => "Abstract" 1 => "Background" 2 => "Methods" 3 => "Results" 4 => "Comments" ] ] 3 => array:2 [ "identificador" => "xpalclavsec1642626" "titulo" => "Keywords" ] 4 => array:2 [ "identificador" => "sec0005" "titulo" => "Introducción" ] 5 => array:2 [ "identificador" => "sec0010" "titulo" => "Caso clínico" ] 6 => array:2 [ "identificador" => "sec0015" "titulo" => "Resultados y discusión" ] 7 => array:2 [ "identificador" => "sec0020" "titulo" => "Financiación" ] 8 => array:2 [ "identificador" => "sec0025" "titulo" => "Conflicto de intereses" ] 9 => array:2 [ "identificador" => "sec0030" "titulo" => "Agradecimientos" ] 10 => array:1 [ "titulo" => "Bibliografía" ] ] ] "pdfFichero" => "main.pdf" "tienePdf" => true "fechaRecibido" => "2010-07-22" "fechaAceptado" => "2010-10-25" "PalabrasClave" => array:2 [ "es" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Palabras clave" "identificador" => "xpalclavsec1642627" "palabras" => array:6 [ 0 => "Enfermedad granulomatosa crónica" 1 => "CYBB" 2 => "Dihidrorodamina-123" 3 => "NADPH oxidasa" 4 => "Diagnóstico prenatal" 5 => "Inmunodeficiencia primaria" ] ] ] "en" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Keywords" "identificador" => "xpalclavsec1642626" "palabras" => array:6 [ 0 => "Chronic granulomatous disease" 1 => "CYBB" 2 => "Dihydrorhodamine-123" 3 => "NADPH oxidase" 4 => "Prenatal diagnosis" 5 => "Primary immunodeficiency" ] ] ] ] "tieneResumen" => true "resumen" => array:2 [ "es" => array:2 [ "titulo" => "Resumen" "resumen" => "<span><span class="elsevierStyleSectionTitle">Introducción</span><p id="spar0005" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">La enfermedad granulomatosa crónica (EGC) es una inmunodeficiencia primaria poco frecuente que se produce por la inactivación del complejo enzimático NADPH oxidasa. Estos pacientes presentan la función fagocítica alterada, lo que les hace más susceptibles a padecer infecciones bacterianas y/o fúngicas.</p></span> <span><span class="elsevierStyleSectionTitle">Métodos</span><p id="spar0010" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Se estudió a un niño de 6 años con sospecha de EGC. El estudio funcional de NADPH oxidasa estaba alterado, diagnosticándose de EGC. Simultáneamente, se nos informó del segundo embarazo de la madre y se solicitó consejo genético.</p></span> <span><span class="elsevierStyleSectionTitle">Resultados</span><p id="spar0015" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Se identificó una mutación nueva causante de enfermedad mediante secuenciación directa del gen <span class="elsevierStyleItalic">CYBB</span> (EGC ligada al X) en el paciente afecto. Al mismo tiempo, se hizo el estudio prenatal cuyo resultado fue la identificación de la misma mutación en el feto.</p></span> <span><span class="elsevierStyleSectionTitle">Conclusiones</span><p id="spar0020" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Es necesario hacer el estudio molecular de la EGC para realizar el diagnóstico de certeza de la enfermedad del paciente con el objetivo de ofrecer diagnóstico prenatal y consejo genético en futuros embarazos.</p></span>" ] "en" => array:2 [ "titulo" => "Abstract" "resumen" => "<span><span class="elsevierStyleSectionTitle">Background</span><p id="spar0025" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Chronic Granulomatous Disease (CGD) is a rare primary immunodeficiency caused by the alteration of the enzyme complex NADPH oxidase, which affects the phagocytic function. CGD patients are susceptible to recurrent infections mainly caused by bacteria and/or fungi.</p></span> <span><span class="elsevierStyleSectionTitle">Methods</span><p id="spar0030" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">We studied a 6 year-old boy with suspicion of CGD. The diagnosis was confirmed based on the functional study of NADPH oxidase. Simultaneously, the second pregnancy of the mother was reported and genetic counselling was requested.</p></span> <span><span class="elsevierStyleSectionTitle">Results</span><p id="spar0035" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">We identified a new disease-causing mutation by direct sequencing of the <span class="elsevierStyleItalic">CYBB</span> gene (X-linked CGD). The prenatal study resulted in the identification of the same mutation in the foetus.</p></span> <span><span class="elsevierStyleSectionTitle">Comments</span><p id="spar0040" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Molecular genetics characterisation of CGD is needed to obtain an accurate diagnosis of the disease and to offer prenatal diagnosis and genetic counselling in future pregnancies.</p></span>" ] ] "multimedia" => array:2 [ 0 => array:7 [ "identificador" => "fig0005" "etiqueta" => "Figura 1" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr1.jpeg" "Alto" => 2090 "Ancho" => 2295 "Tamanyo" => 216400 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "<p id="spar0045" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Prueba DHR en el paciente, madre, padre y control sano.</p>" ] ] 1 => array:7 [ "identificador" => "fig0010" "etiqueta" => "Figura 2" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr2.jpeg" "Alto" => 2415 "Ancho" => 2500 "Tamanyo" => 428319 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "<p id="spar0050" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Caracterización molecular de la mutación en el gen <span class="elsevierStyleItalic">CYBB.</span> A) Representación esquemática del gen y secuencias de ADN de la mutación (IVS6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>+<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4A>G) encontrada en el paciente, feto, madre portadora, padre y control sano. B) Amplificación por RT-PCR entre el exón 5 y el exón 7 en el paciente (amplificado más acortado debido a la deleción del exón 6), madre portadora (con 2 bandas), padre y control sano. C) Secuencia de ADNc del paciente mostrando la deleción del exón 6.</p>" ] ] ] "bibliografia" => array:2 [ "titulo" => "Bibliografía" "seccion" => array:1 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "bibs0005" "bibliografiaReferencia" => array:13 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "bib0005" "etiqueta" => "1" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:2 [ "titulo" => "Chronic Granulomatous Disease: The European Experience" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => true "autores" => array:6 [ 0 => "J. Van den Berg" 1 => "E. Van Koppen" 2 => "A. Ahlin" 3 => "B. Belohradsky" 4 => "E. Bernatowska" 5 => "L. Corbeel" ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1371/journal.pone.0005234" "Revista" => array:5 [ "tituloSerie" => "PLoS ONE." 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| 2024 Octubre | 134 | 42 | 176 |
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| 2021 Marzo | 164 | 30 | 194 |
| 2021 Febrero | 143 | 27 | 170 |
| 2021 Enero | 114 | 21 | 135 |
| 2020 Diciembre | 146 | 18 | 164 |
| 2020 Noviembre | 86 | 20 | 106 |
| 2020 Octubre | 107 | 15 | 122 |
| 2020 Septiembre | 85 | 23 | 108 |
| 2020 Agosto | 71 | 13 | 84 |
| 2020 Julio | 65 | 23 | 88 |
| 2020 Junio | 71 | 15 | 86 |
| 2020 Mayo | 87 | 14 | 101 |
| 2020 Abril | 66 | 27 | 93 |
| 2020 Marzo | 49 | 14 | 63 |
| 2020 Febrero | 69 | 20 | 89 |
| 2020 Enero | 49 | 18 | 67 |
| 2019 Diciembre | 59 | 17 | 76 |
| 2019 Noviembre | 64 | 9 | 73 |
| 2019 Octubre | 65 | 14 | 79 |
| 2019 Septiembre | 54 | 14 | 68 |
| 2019 Agosto | 58 | 35 | 93 |
| 2019 Julio | 52 | 16 | 68 |
| 2019 Junio | 57 | 17 | 74 |
| 2019 Mayo | 120 | 22 | 142 |
| 2019 Abril | 108 | 25 | 133 |
| 2019 Marzo | 67 | 26 | 93 |
| 2019 Febrero | 38 | 18 | 56 |
| 2019 Enero | 53 | 15 | 68 |
| 2018 Diciembre | 44 | 30 | 74 |
| 2018 Noviembre | 64 | 10 | 74 |
| 2018 Octubre | 75 | 18 | 93 |
| 2018 Septiembre | 29 | 14 | 43 |
| 2018 Agosto | 5 | 0 | 5 |
| 2018 Julio | 6 | 0 | 6 |
| 2018 Junio | 5 | 0 | 5 |
| 2018 Mayo | 10 | 0 | 10 |
| 2018 Abril | 56 | 0 | 56 |
| 2018 Marzo | 48 | 0 | 48 |
| 2018 Febrero | 32 | 0 | 32 |
| 2018 Enero | 32 | 1 | 33 |
| 2017 Diciembre | 46 | 0 | 46 |
| 2017 Noviembre | 40 | 0 | 40 |
| 2017 Octubre | 43 | 0 | 43 |
| 2017 Septiembre | 36 | 0 | 36 |
| 2017 Agosto | 24 | 0 | 24 |
| 2017 Julio | 36 | 0 | 36 |
| 2017 Junio | 47 | 8 | 55 |
| 2017 Mayo | 41 | 19 | 60 |
| 2017 Abril | 27 | 10 | 37 |
| 2017 Marzo | 28 | 4 | 32 |
| 2017 Febrero | 53 | 4 | 57 |
| 2017 Enero | 33 | 7 | 40 |
| 2016 Diciembre | 51 | 7 | 58 |
| 2016 Noviembre | 79 | 20 | 99 |
| 2016 Octubre | 75 | 12 | 87 |
| 2016 Septiembre | 83 | 15 | 98 |
| 2016 Agosto | 55 | 9 | 64 |
| 2016 Julio | 17 | 7 | 24 |
| 2016 Junio | 3 | 0 | 3 |
| 2016 Mayo | 2 | 0 | 2 |
| 2016 Abril | 3 | 0 | 3 |
| 2016 Marzo | 8 | 0 | 8 |
| 2016 Febrero | 1 | 0 | 1 |
| 2016 Enero | 1 | 9 | 10 |
| 2015 Diciembre | 5 | 0 | 5 |
| 2015 Noviembre | 7 | 0 | 7 |
| 2015 Octubre | 4 | 0 | 4 |
| 2015 Septiembre | 3 | 0 | 3 |
| 2015 Agosto | 6 | 0 | 6 |
| 2015 Julio | 12 | 0 | 12 |
| 2015 Junio | 12 | 1 | 13 |
| 2015 Mayo | 12 | 0 | 12 |
| 2015 Abril | 15 | 3 | 18 |
| 2015 Marzo | 11 | 7 | 18 |
| 2015 Febrero | 11 | 7 | 18 |
| 2015 Enero | 14 | 0 | 14 |
| 2014 Diciembre | 17 | 1 | 18 |
| 2014 Noviembre | 17 | 1 | 18 |
| 2014 Octubre | 23 | 1 | 24 |
| 2014 Septiembre | 20 | 3 | 23 |
| 2014 Agosto | 22 | 1 | 23 |
| 2014 Julio | 32 | 0 | 32 |
| 2014 Junio | 62 | 2 | 64 |
| 2014 Mayo | 67 | 4 | 71 |
| 2014 Abril | 72 | 6 | 78 |
| 2014 Marzo | 63 | 8 | 71 |
| 2014 Febrero | 61 | 14 | 75 |
| 2014 Enero | 54 | 11 | 65 |
| 2013 Diciembre | 64 | 8 | 72 |
| 2013 Noviembre | 61 | 10 | 71 |
| 2013 Octubre | 67 | 9 | 76 |
| 2013 Septiembre | 49 | 21 | 70 |
| 2013 Agosto | 68 | 20 | 88 |
| 2013 Julio | 42 | 6 | 48 |
| 2013 Junio | 1 | 2 | 3 |
| 2013 Mayo | 2 | 2 | 4 |
| 2013 Abril | 0 | 1 | 1 |
| 2012 Julio | 0 | 1 | 1 |
| 2011 Marzo | 1417 | 0 | 1417 |
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